EC Medium (Bouillon EC) est un milieu de culture sélectif utilisé pour la détection et l’énumération présomptive des coliformes fécaux, en particulier Escherichia coli, selon la méthode du Nombre le Plus Probable (MPN/NPP). Il est recommandé pour l’analyse microbiologique des échantillons d’eau (eau potable, eaux de surface, coquillages) et des denrées alimentaires.
Principe
Initialement décrit par Hajna et Perry, le milieu EC est utilisé comme test confirmatif après enrichissement préalable (notamment à partir du bouillon Lauryl Sulfate).
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Tryptone : source d’azote et de nutriments essentiels
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Lactose : sucre fermentescible permettant la détection par production de gaz
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Sels biliaires : inhibition des bactéries Gram positives (bacilles et streptocoques fécaux)
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Phosphates : maintien du pH pendant la fermentation
La formation de gaz dans un tube de Durham après incubation (24 h) constitue une preuve présomptive de la présence de coliformes.
Conditions d’incubation
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37°C : détection générale des coliformes
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44–44,5°C : confirmation des coliformes fécaux et isolement de E. coli (eau, coquillages)
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45,5°C : analyses alimentaires
Mode d’emploi
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Suspendre 37 g de poudre dans 1000 ml d’eau distillée/purifiée.
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Chauffer si nécessaire pour dissoudre complètement.
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Distribuer en tubes avec cloche de Durham inversée.
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Stériliser à 121°C pendant 15 minutes.
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Ajuster la concentration selon le volume d’échantillon analysé.
Contrôle qualité
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Aspect : poudre homogène crème à jaune
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pH final : 6,9 ± 0,2 à 25°C
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Croissance typique observée après 24 h à 44,5°C
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Escherichia coli ATCC 25922 : croissance abondante, gaz positif
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Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 : croissance abondante, gaz positif
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Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 : croissance modérée, gaz négatif
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Enterococcus faecalis ATCC 29212 : inhibée
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Précautions
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Usage exclusivement en laboratoire.
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Porter les équipements de protection individuelle.
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Ne pas utiliser pour isolement direct sans enrichissement préalable.
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Les résultats finaux doivent être confirmés par des tests morphologiques, biochimiques et/ou sérologiques.
Stockage
Conserver entre 10–30°C, dans un récipient hermétiquement fermé, à l’abri de l’humidité.
Durée de vie conforme à la date de péremption indiquée sur l’étiquette.
Élimination
Les milieux et matériels contaminés doivent être stérilisés par autoclavage ou incinération conformément aux procédures de laboratoire en vigueur.



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